|
|
Vliv indolových alkaloidů na vybrané buněčné linie a DNA struktury
Dobrovolná, Michaela ; Hoová, Julie (oponent) ; Brázda, Václav (vedoucí práce)
G-kvadruplexy (G4) jsou sekundární struktury DNA tvořené seskupením guaninů, u kterých bylo prokázáno, že hrají roli v mnoha biologických funkcích, včetně regulace načasování replikace a potlačení exprese onkogenů. V této práci byly testovány čtyři rostlinné alkaloidy (harmin, harman, harmalin a brucin), jako potenciální G4 ligandy, které by mohly regulovat, indukovat, nebo konvertovat různé topologie G4. Dále byl studován jejich vliv na buněčné linie kožních fibroblastů HDF164 a karcinomu prsu MCF-7, u kterých byl prokázán na dávce závislý mechanismus inhibice růstu. U harminu, harmalinu a brucinu byla potvrzena interakce s paralelním G4 promotoru protoonkogenu c-Myc, u harminu, harmanu a harmalinu s hybridním G4 telomerické DNA. Navíc byla ověřena schopnost testovaných sloučenin interagovat s dvouřetězcovou DNA telecího brzlíku (ctDNA) pomocí UV-Vis absorpční spektroskopie. Metylační test ukázal, že DNA buněk MCF 7 ošetřených harminem a brucinem byla hypermetyovaná.
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita.
Vrabec, Rudolf ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Kokoška, Ladislav (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Rudolf Vrabec Školitel: prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název disertační práce: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita Klíčová slova: Vinca, indolové alkaloidy, Alzheimerova choroba, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, cytotoxicita, dockingová studie Z nati Vinca minor L. (Apocynaceae) bylo chromatografickými metodami vyizolováno 23 monoterpenových indolových alkaloidů různých strukturních typů, které byly identifikovány pomocí kombinace analytických technik (NMR, MS, HRMS, optická otáčivost). Mezi izolovanými látkami se nacházela i dosud nepopsaná alkaloidní struktura, která byla pojmenovaná vinkaminorudein. Celkem 11 alkaloidů bylo v tomto rostlinném druhu identifikováno poprvé. Látky, které byly získány v dostatečném množství, byly podrobeny testům vůči inhibici hAChE, hBuChE, POP, a GSK-3β - enzymům hrající klíčovou roli v patogenezi Alzheimerovy choroby. Z testovaných alkaloidů byl nejaktivnější (−)-2-ethyl-3[2-(3- ethylpiperidinyl)-ethyl]-1H-indol (VR-19) s IC50 = 0,65 µM pro hBuChE, a IC50 = 58 µM pro POP. Z dalších alkaloidů významnou inhibici vůči hBuChE (IC50 30 µM) vykazovaly vinkaminorein, minovin, 16-methoxyminovin, vinkorin a tubotaiwin. Žádný z alkaloidů...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita.
Vrabec, Rudolf ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Kokoška, Ladislav (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Rudolf Vrabec Školitel: prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název disertační práce: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita Klíčová slova: Vinca, indolové alkaloidy, Alzheimerova choroba, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, cytotoxicita, dockingová studie Z nati Vinca minor L. (Apocynaceae) bylo chromatografickými metodami vyizolováno 23 monoterpenových indolových alkaloidů různých strukturních typů, které byly identifikovány pomocí kombinace analytických technik (NMR, MS, HRMS, optická otáčivost). Mezi izolovanými látkami se nacházela i dosud nepopsaná alkaloidní struktura, která byla pojmenovaná vinkaminorudein. Celkem 11 alkaloidů bylo v tomto rostlinném druhu identifikováno poprvé. Látky, které byly získány v dostatečném množství, byly podrobeny testům vůči inhibici hAChE, hBuChE, POP, a GSK-3β - enzymům hrající klíčovou roli v patogenezi Alzheimerovy choroby. Z testovaných alkaloidů byl nejaktivnější (−)-2-ethyl-3[2-(3- ethylpiperidinyl)-ethyl]-1H-indol (VR-19) s IC50 = 0,65 µM pro hBuChE, a IC50 = 58 µM pro POP. Z dalších alkaloidů významnou inhibici vůči hBuChE (IC50 30 µM) vykazovaly vinkaminorein, minovin, 16-methoxyminovin, vinkorin a tubotaiwin. Žádný z alkaloidů...
|
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.
Faschingbauer, Jakub ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
Faschingbauer J.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2019. V rámci screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin, prováděné na katedře farmaceutické botaniky FAF UK, byly zkoumány vybrané taxony rodu Centaurea (Asteraceae). Tato studie se zabývá základním fytochemickým výzkumem extraktů připravených z nažek druhů Centaurea cyanus, Centaurea jacea, Centaurea scabiosa, Centaurea pseudophrygia,Centuarea stoebe, Centaurea solstitialis a Centaurea benedicta. Pro objasnění jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené extrakty podrobené důkazovým reakcím na TLC a MS analýze (EI, ESI). Ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty byly zkoumány na potenciální inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (AChE) a plazmové butyrylcholinesterase (BChE) a cytotoxictě vůči vybraným 9 nádorovým liniím. Zajímavou cholinesterasovou aktivitu vykazoval ethyl- acetátový extrakt C. cyanus, který selektivně inhiboval BChE (IC50 BChE = 22,62 ± 3,62 µg/ml; IC50 AChE = 221,50 ± 44,56 µg/ml). Ostatní ethyl-acetátové a ethanolové extrakty dalších vybraných druhů rodu Centaurea byly vůči...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII.
Hojgrová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
V. Hojgrová: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky. Počet stran 69. Tato diplomová práce se zabývá izolací alkaloidů z Vinca minor L. z čeledi Apocynaceae. Separace alkaloidů z vybrané frakce (VM 215-258), respektive z jejich podfrakcí (VM 34-41, VM 86, VM 87-113) probíhala pomocí preparativní TLC. Podařilo se izolovat dva čisté alkaloidy z podfrakce (VH 34-41). První alkaloid VH-1, který nebyl doposud izolován a druhý alkaloid VH-2: (-)-raukubainin. Alkaloidy byly identifikovány na základě EI-MS, LC-MS, NMR a optické otáčivosti a byly porovnány s daty v odborné literatuře. Izolované alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu vůči acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BuChE) a prolyloligopeptidase (POP) a na cytotoxicitu. Obě látky nevykazovaly po změření významnou cholinesterasovou inhibiční aktivitu IC50 vůči AChE, vůči BuChE vykazoval mírnou aktivitu pouze (-)-raukubainin (IC50 = 94 ± 7 μM), VH-1 byl shledán jako neaktivní (IC50 >100 μM). Inhibiční aktivita vůči POP byla testována zatím pouze u (-)-raukubaininu; byl shledán neaktivním (IC50 > 1000 µM). Výsledky cytotoxické aktivity alkaloidů (-)-raukubaininu a VH-1 v době odevzdávání této diplomové...
|
|
|
Vinca minor L. alkaloids and their biological activity II.
Pavuková, Simona ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Pavuková, S.: Alkaloidy Vinca minor L. a ich biologická aktivita II. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky, Hradec Králové 2021. Vinca minor L. je druh kvitnúceho polokru, pôvodom hlavne zo strednej a južnej Európy, ktorý obsahuje viac než 50 indolových alkaloidov. Pri screeningu potenciálnych rastlinných inhibítorov namierených proti ľudskej AChE a BuChE, preukázal alkaloidný extrakt zo sušených nadzemných častí Vinca minor silnú a selektívnu inhibičnú aktivitu namierenú voči BuChE s hodnotou IC50 13,60 ± 0,83 µg/ml avšak proti AChE bol neaktívny (hodnota IC50 >100 µg/ml). Vybraná frakcia VM 323 - 327 (4,72 g) bola rozdelená pomocou stĺpcovej chromatografie na silikagelu stupňovitou elúciou za použitia chloroformu a etanolu a celkovo sa získalo 7 spojených frakcií. Opakovaná preparatívna TLC na silikagelu viedla k izolácii troch zlúčenín; novo vyizolovanej látky SP-1, (-)-pikrininu (SP-2) a deacetylakuammilinu (SP-3). K objasneniu ich štruktúry bola použitá hmotnostná spektrometria (ESI), NMR a optická otáčavosť. Izolované alkaloidy boli podrobené testom inhibičných aktivít voči AChE, BuChE, POP a GSK-3β, ezýmom zohrávajúcim dôležitú úlohu v patofyziológii AD. Ukázalo sa, že všetky izolované látky boli v porovnaní so štandardmi...
|
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L. II.
Miklová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Miklová V.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L. II. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020. Diplomová práce zpracovávaná na katedře farmaceutické botaniky FAF UK je součástí screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin vybraných taxonů rodů Centaurea L. a Psephellus L. z čeledi Asteraceae. Sekundární metabolity jsou zodpovědné za různé účinky na lidský organismus. Studie se zabývá fytochemickým výzkumem extraktů připravených z natí druhů Centaurea cyanus L., Centaurea stoebe L., Cyanus montanus (L.) Hill, Centaurea benedicta L., Centaurea jacea L., Centaurea macrocephala Muss. Puschk. ex. Willd, Centaurea solstitialis L., Centaurea nigra L., Centaurea scabiosa L., Psephellus bellus (Trautv.) Wagenitz, Centaurea pannonica (Heuff.) Hayek a Psephellus dealbatus (Willd) K. Koch. Pro detekci jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty podrobeny důkazovým reakcím na tenkovrstvou chromatografii. V souladu s dříve publikovanými výsledky byly v extraktech detekovány seskviterpeny, flavonoidy, kumariny, fenolické sloučeniny, steroidy a terpeny. U extraktů druhu Centaurea benedicta...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita I.
Jurkaninová, Martina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
8 ABSTRAKT Jurkaninová, M.: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita I. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky, Hradec Králové 2019, Cieľom tejto diplomovej práce bola izolácia alkaloidov z vybranej podfrakcie č.3 (15-36), ktorá bola súčasťou frakcie VM 323-327. Tá bola získaná z predošlého spracovania alkaloidného extraktu z Vinca minor L. na našej katedre v rámci vypracovania diplomovej práce Anety Vítovcovej.[78] Frakcia VM 323-327 bola separovaná stĺpcovou chromatografiou na silikagéle a bolo získaných celkom 7 podfrakcií. Následné opakované spracovanie vybranej podfrakcie č.3 (15-36) preparatívnou TLC na silikagéle viedlo k izolácii alkaloidov (-)-vinoxínu a jeho racemátu (±)- vinoxínu. Identifikácia štruktúry bola určená na základe MS, NMR a optickej otáčavosti. U izolovaných látok bola stanovená inhibičná aktivita voči acetylcholínesteráze, butyrylcholínesteráze a prolyl oligopeptidáze. Inhibičná aktivita voči vybraným enzýmom bola meraná spektrofotometrickými metódami. Izolované alkaloidy boli voči AChE a POP požadované ako neaktívne (IC50 >1000 μM), voči BChE vykazovali signifikantnú selektívnu aktivitu (-)-vinoxín (IC50 =24,61 ± 1,71) a (±)-vinoxín (IC50 =27,39 ± 4,87). Tieto látky by sa mohli potencionálne uplatniť...
|
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.
Faschingbauer, Jakub ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
Faschingbauer J.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2019. V rámci screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin, prováděné na katedře farmaceutické botaniky FAF UK, byly zkoumány vybrané taxony rodu Centaurea (Asteraceae). Tato studie se zabývá základním fytochemickým výzkumem extraktů připravených z nažek druhů Centaurea cyanus, Centaurea jacea, Centaurea scabiosa, Centaurea pseudophrygia,Centuarea stoebe, Centaurea solstitialis a Centaurea benedicta. Pro objasnění jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené extrakty podrobené důkazovým reakcím na TLC a MS analýze (EI, ESI). Ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty byly zkoumány na potenciální inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (AChE) a plazmové butyrylcholinesterase (BChE) a cytotoxictě vůči vybraným 9 nádorovým liniím. Zajímavou cholinesterasovou aktivitu vykazoval ethyl- acetátový extrakt C. cyanus, který selektivně inhiboval BChE (IC50 BChE = 22,62 ± 3,62 µg/ml; IC50 AChE = 221,50 ± 44,56 µg/ml). Ostatní ethyl-acetátové a ethanolové extrakty dalších vybraných druhů rodu Centaurea byly vůči...
|
host ::
RSS.